宿主蛋白核仁素与病毒基因组结合促进牛肠道病毒的复制

作者：魏丹丹; 孙超; 常继涛; 于力

来源：中国预防兽医学报, 2022, 1-7.

• 牛肠道病毒
• 核仁素
• 内部核糖体进入位点
• 病毒复制

为了探究宿主蛋白核仁素（NCL）对牛肠道病毒（BEV）复制的影响及其作用机制，本研究在过表达或敲低NCL的乳仓鼠肾细胞（BHK-21）中感染BEV，用qPCR、Western blot及TCID_(50)分别检测病毒基因组RNA 、BEV结构蛋白VP1及病毒滴度的变化，结果表明，过表达NCL明显促进BEV在BHK-21细胞中的复制，而敲低NCL明显抑制BEV的复制。进而用NCL特异性抗体对感染BEV的BHK-21细胞进行RNA免疫共沉淀试验检测蛋白与病毒基因组是否结合，结果表明，NCL可以与BEV基因组RNA结合。而且，通过激光共聚焦试验观察接种BEV的BHK-21细胞中NCL蛋白的亚细胞定位和分布，结果表明，BEV感染细胞后使NCL由核仁迁移至细胞质，与病毒基因组在细胞质中共定位。另外，通过双荧光素酶报告基因试验分别在NCL过表达或敲低的BHK-21细胞检测BEV的内部核糖体进入位点（IRES）介导的病毒蛋白翻译起始活性，结果表明，过表达NCL显著提高BEV IRES的翻译起始活性，而敲低NCL显著抑制BEV IRES的翻译起始活性。本研究首次证实NCL与BEV基因组间存在相互作用，该互作可促进BEV IRES介导的病毒蛋白翻译以及BEV复制的功能，该结果为BEV复制的分子调控机制提供了新的见解。

• 单位
  中国农业科学院哈尔滨兽医研究所; 兽医生物技术国家重点实验室