H2O2诱导的氧化应激通过线粒体途径引起RLE-6TN细胞凋亡

作者：程越峰; 李璟; 段岚天; 焦宗宪^*; 陈嘉萌

来源：中国组织化学与细胞化学杂志, 2023, 32(04): 347-353.

DOI：10.16705/j.cnki.1004-1850.2023.04.002

• 氧化应激
• 凋亡
• 萝卜硫素
• N-乙酰半胱氨酸

目的 研究氧化应激下的大鼠肺泡II型上皮细胞(RLE-6TN)的凋亡途径，并观察萝卜硫素(sulforaphane,SFN)和N-乙酰半胱氨酸(N-acetyl cysteine,NAC)对氧化损伤的保护作用。方法 体外培养的RLE-6TN建立H2O2损伤模型，MTT比色法检测细胞生长抑制情况，确定实验最佳的H2O2刺激浓度及SFN和NAC的干预浓度。将RLE-6TN细胞分为Control组、H2O2损伤模型组及H2O2+SFN和H2O2+NAC治疗组，通过Western blot、流式细胞术、Hoechst 33258染色检测氧化应激过程中的细胞的形态、ROS水平、Ca2+水平、线粒体膜电位变化等，观察H2O2诱导RLE-6TN细胞的氧化损伤以及SFN和NAC的保护作用。结果 H2O2损伤模型组与对照组比较，细胞凋亡明显，线粒体膜电位降低，ROS和Ca2+水平升高，p53、BAX和Caspase-3水平增加，BCL2水平降低；经SFN和NAC保护治疗后，与损伤模型组相比，细胞凋亡明显减少，线粒体膜电位升高；ROS、Ca2+、p53、BAX、Caspase-3水平降低，BCL2水平升高。结论 H2O2诱导的氧化应激可以通过线粒体途径引起RLE-6TN细胞的凋亡；SFN和NAC对H2O2所致RLE-6TN细胞的氧化损伤具有保护作用。

• 单位
  基础医学院; 兰州大学