siCASK重组载体构建及效应检测

作者：孙荣距; 杨宗城; 苏踊跃; 蔡震; 唐红英; 罗向东

来源：第三军医大学学报, 2004, (23): 2123-2125.

DOI：10.16016/j.1000-5404.2004.23.016

• 钙钙调蛋白依赖的丝氨酸蛋白激酶
• RNA干扰
• 内皮细胞

目的　构建针对人CASK基因的siRNA质粒 ,建立CASK下调表达的细胞模型 ,为CASK相关的细胞信号研究奠定基础。方法　选择人CASK基因不同靶点 ,体外合成DNA模板 ,经退火后插入到pSilencer3 .1hygro载体的多克隆位点。阳性重组质粒转染ECV3 0 4细胞 ,蛋白印迹。观察siCASK对目的蛋白表达的抑制效率。结果　酶切、测序表明以pSi lencer3 .1hygro为载体的重组质粒siCASK构建成功。siCASK转染细胞后 ,能够明显抑制目的蛋白的表达。结论　成功构建了siRNA重组质粒 ,为下一步CASK功能研究奠定基础。

• 单位
  中国人民解放军陆军军医大学