低氧环境下甲状腺乳头状癌细胞中期因子表达的调节机制研究

作者：李吉^*; 张建辉; 谢中意; 李君强

来源：浙江医学, 2023, 45(09): 931-938.

• 甲状腺乳头状癌
• 缺氧诱导因子-1α
• CD10
• 半乳糖凝集素3
• 中期因子

目的 探讨低氧环境下甲状腺乳头状癌(PTC)细胞中期因子(Midkine)表达的调节机制。方法 以人PTC细胞系BCPAP和TPC1为材料，使用低氧、缺氧诱导因子-1α(HIF1-α)稳定剂DMOG刺激，使用HIF1-α小发夹RNA(HIF1-αshRNA)转染，采用Western blot法分别检测不同细胞HIF1-α、CD10与半乳糖凝集素3(gal3)蛋白表达的变化。采用双荧光素报告酶法检测HIF1-α与CD10、gal3 mRNA的靶向关系，并在公共数据库中检测HIF1-α与CD10、gal3 mRNA表达的关联。将BCPAP和TPC1为对照组、CD10的编码基因膜金属肽内切酶(MME)敲低组(转染MME shRNA)、gal3的编码基因人可溶性半乳糖凝集素3(LGALS3)敲低组(转染LGALS3 shRNA)、MME+LGALS3共敲低组(共转染MME shRNA和LGALS3 shRNA)，采用Western blot法检测各组HIF1-α、CD10和gal3蛋白相对表达量，采用ELISA法检测各组Midkine水平。结果 低氧、DMOG刺激下，细胞CD10和gal3蛋白相对表达量均上升(均P<0.01)，且呈时间依赖性。转染HIF1-α后，细胞CD10和gal3蛋白相对表达量均显著下降(均P<0.01)；双荧光素报告酶实验显示，HIF1-α cDNA与CD10和gal3启动子靶向结合，增强两者的转录表达；HIF1-α与MME mRNA和LGALS3 mRNA表达的相关系数分别为0.43和0.58，均呈正相关(均P<0.01)。随缺氧时间延长，细胞中Midkine表达水平升高；相比对照组，MME敲低组、LGALS3敲低组和实验组Midkine表达水平显著降低，差异均有统计学意义(均P<0.01)。结论 低氧环境下PTC细胞系能够通过HIF1-α调节CD10、gal3的表达，进而调节Midkine表达。

• 单位
  宁波市北仑区人民医院