HPLC-荧光法测定醛糖还原酶的活性

作者：陈修平; 石京山

来源：中国药理学通报, 2012, 28(10): 1472-1475.

• 醛糖还原酶
• HPLC
• NADP 衍生物
• 荧光
• 大鼠
• 肾脏 aldose reductase
• NADP derivative
• fluorescence
• rats
• kidney

目的建立一种基于NADP+衍生物荧光的高灵敏度的体外测定醛糖还原酶(aldose reductase,AR)活性的HPLC方法。方法从大鼠的肾脏中分离纯化AR,以DL-甘油醛为底物,加入NADPH启动酶促反应。以C18柱分离NADP+衍生物,流动相为乙腈∶水(75∶25),流速1.0 ml.min-1,柱温25℃,荧光检测激发波长370 nm,发射波长465 nm。测定NADP+衍生物的稳定性以及NADPH、DL-甘油醛、pH、温度对AR活性的影响。结果 NADP+衍生物稳定性好,保留时间为(1.4±0.01)min,附近无干扰峰,其浓度与荧光强度线性关系良好(r=0.9994),最低检测限为...

• 单位
  澳门大学; 遵义医科大学