β-catenin过表达的间充质干细胞对改善海水吸入型肺损伤治疗效果的研究

作者：王博荣; 李鹏程; 刘菲; 金发光

来源：中华肺部疾病杂志(电子版), 2018, 11(01): 20-24.

• 急性肺损伤
• 海水淹溺
• 间充质干细胞
• Wnt/β-catenin信号通路

目的构建过表达β-catenin的慢病毒载体并建立大鼠MSCs稳转细胞株;研究过表达β-catenin的MSCs对损伤的肺泡上皮细胞的修复作用,以及对治疗海水吸入型肺损伤(seawater inhalation induced acute lung injury,SWI-ALI)大鼠模型的疗效。方法 MSCs转染:MSCs(2×105/孔)接种于六孔板过夜培养,慢病毒转染。转染慢病毒载体的MSCs表达稳定性和转染效率检测。雄性SD大鼠36只随机分为四组(每组9只),分别为空白对照组、SWI-ALI模型组、MSCs治疗组、MSCs-Ctnnb1治疗组。造模后4 h取各组肺组织标本进行苏木精-伊红染色(Hematoxylin and eosin staining,HE staining)行病理组织学检查评估肺损伤。NIR815染料标记对照组MSCs和过表达组MSCs-Ctnnb1干细胞,注入两组SWI-ALI大鼠模型气道,分别在干预后12、48 h行体外近红外光谱肺部成像对比干细胞定殖效果。最后进行数据统计分析。结果构建活化β-catenin的慢病毒稳转大鼠MSCs细胞株:培养至第10代,通过荧光显微镜观察检测转染有目的基因的MSCs表达感染效率仍大于90%。动物实验:病理损伤评估:海水吸入型肺损伤大鼠肺组织标本经苏木精-伊红染色镜下观察到肺泡壁增厚,肺泡间质炎性浸润,肺泡充血、水肿。这些组织病理学特征在MSCs治疗组和MSCs-Ctnnb1治疗组海水干预后4 h比SWI-ALI模型组明显缓解。MSCs-Ctnnb1治疗组比MSCs治疗组病理改善效果更好。MSCs在肺内定殖:MSCs治疗组和MSCs-Ctnnb1治疗组大鼠在海水干预后12 h和48 h肺组织进行体外近红外光谱成像追踪肺内MSCs,MSCs-Ctnnb1治疗组比MSCs治疗组海水干预后12 h和48 h荧光信号表达更强,定殖效果更好。结论通过β-catenin过表达激活经典Wnt/β-catenin通路提高间充质干细胞的增殖及向受损肺组织的迁移能力,增加MSCs在肺内的定殖、缓解病理损伤,并提高MSCs对SWI-ALI的治疗效果。

• 单位
  唐都医院; 第四军医大学