摘要
目的探讨人喉鳞癌Hep-2细胞血红素加氧酶1(HO-1)表达对卡铂作用的影响及其可能的作用机制。方法将对数生长期Hep-2细胞分为六组。空白对照组不干预,Zn PP(HO-1抑制剂锌原卟啉)组加入Zn PP 10μmol/L;Hemin(HO-1诱导剂氯化血红素)组加入Hemin 10μmol/L;卡铂组加入卡铂10μg/m L;Hemin联合卡铂组先加入Hemin 10μmol/L,作用1 h后再加入卡铂10μg/m L;Zn PP联合卡铂组先加入Zn PP 10μmol/L,作用1 h后再加入卡铂10μg/m L。每组设5个复孔,加药后培养24 h。采用MTT法观察各组细胞存活率;RT-PCR、Western blotting法检测各组细胞内HO-1 mRNA和蛋白表达情况;DCFH-DA探针检测各组细胞内活性氧(ROS);流式细胞术检测各组细胞凋亡率。结果 1细胞存活率:与空白对照组比较,卡铂组和Zn PP组明显降低,Hemin组明显升高(P均<0.05);与卡铂组比较,Zn PP联合卡铂组明显降低,Hemin联合卡铂组明显升高(P均<0.05)。2细胞HO-1 mRNA和蛋白相对表达量:与空白对照组比较,卡铂组和Hemin组明显升高,Zn PP组明显下降(P均<0.05);与卡铂组比较,Zn PP联合卡铂组明显降低,Hemin联合卡铂组明显升高(P均<0.05)。3细胞凋亡率:与空白对照组比较,卡铂组、Zn PP组明显升高(P均<0.05);与卡铂组比较,Zn PP联合卡铂组明显升高,Hemin联合卡铂组明显降低(P均<0.05);4细胞内ROS活性:与空白对照组比较,卡铂组、Zn PP组显著增高(P均<0.05);与卡铂组比较,Zn PP联合卡铂组明显升高,Hemin联合卡铂组明显降低(P均<0.05)。结论 HO-1在Hep-2细胞内的高表达可影响卡铂对Hep-2细胞的促凋亡作用,应用Zn PP后HO-1表达下调,同时提高了人喉鳞癌Hep-2细胞在卡铂作用下的凋亡率,这一过程可能与增强细胞内ROS水平相关。
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单位河北医科大学; 河北医科大学第一医院