摘要
目的:观察IP3R(s1,4,5三磷酸肌醇受体)在GC-2std(GC-2)细胞中的表达情况并探讨IP3Rs在GC-2细胞增殖中的作用。方法:用RT-PCR检测IP3Rs在GC-2细胞以及在小鼠大脑,心肌,骨骼肌及睾丸中的分布情况。免疫荧光法检测IP3Rs在细胞中的分布及表达;MTT法检测不同浓度2-APB(IP3Rs拮抗剂)的作用下,IP3Rs对细胞增殖的影响,利用流式细胞术检测2-APB对细胞周期的影响。结果:IP3Rs的三种亚型在GC-2细胞中均有表达且在小鼠大脑、心肌、骨骼肌、睾丸等多种组织中广泛分布;免疫荧光实验亦表明IP3Rs分布于胞膜、胞质及核内。相差显微镜下观察,发现2-APB处理组比对照组细胞数量少。MTT实验结果亦表明:随着2-APB浓度的增加(5、25、100、200、400uM),其吸光值呈浓度依赖性的减小,经统计学分析:25uM浓度组即具有显著性差异(p<0.05)且EC50=92.0114。流式细胞结果显示:与对照组比较,100uM2-APB处理组细胞处于S期、G2期的数目增多。结论:IP3Rs在GC-2细胞及小鼠多种组织中表达,与细胞的增殖密切相关,可能与其参与调节细胞周期有关。
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单位江苏省人民医院; 公共卫生学院; 南京医科大学