4种实时荧光PCR试剂在大米转基因检测中的应用比较

作者：权永兵; 闫邦奇; 王进; 林伟; 徐淼锋; 水克娟; 廖力; 张卫东

来源：中国口岸科学技术, 2020, (07): 74-80.

• 实时荧光PCR
• 转基因
• 检测

本文比较评价了4种荧光PCR试剂在大米转基因检测中的应用效果,筛选出最适合转基因成分检测的试剂,并建立相关检测方法体系。将同一大米样品提取的核酸做5个浓度梯度,用4种不同品牌的荧光探针PCR试剂同时扩增大米内源Gos9基因,分析4种试剂检测结果的差异和相关性。4种试剂对目标基因均有特异性扩增,模板量最高(250 ng)时,编号为Ti的试剂扩增的Ct值最小(23.36),Bi是25.19,Pr和Ta差异不明显(分别为27.76和27.35);当模板量为25 pg时,编号为Bi的试剂扩增的Ct值最小(35.45),其余分别为Ta(37.85)、Ti(35.85)和Pr(42.26)。由结果可以看出,Bi试剂的扩增效率、灵敏度和稳定性都优于其他试剂,特别是在模板量浓度低的情况下检测结果最佳。不同试剂对相同模板的扩增效率不同,综合评价得出Bi试剂的稳定性、灵敏度和准确度在4种试剂中最好,可稳定用于大米及其加工产品的转基因检测。

• 单位
  拱北海关技术中心; 珠海宝锐生物科技有限公司