EP-15A3在荧光定量PCR测定HBV-DNA精密度和正确度验证中的应用

作者：李育敏; 张水兰; 阚丽娟; 汤花梅; 熊丹; 许晓清; 李方勇; 张秀明

来源：国际检验医学杂志, 2019, 40(05): 629-631.

• 精密度
• 正确度
• 性能验证
• 乙型肝炎病毒核酸
• EP15-A3

目的探讨美国临床和实验室标准化协会(CLSI)EP15-A3在荧光定量聚合酶链式反应(PCR)法测定乙型肝炎病毒核酸(HBV-DNA)精密度和正确度验证中的应用价值。方法按照CLSI EP15-A3方案,以北京康彻思坦高、低2个浓度水平HBV-DNA标准物质作为精密度和正确度验证样本,采用荧光定量PCR法测定HBV-DNA。每个样本重复测定5次,持续5d,得到25个数据。Grubbs′法计算离群值,单因素方差分析用户重复性(批内不精密度_,S_R)、实验室内不精密_(度()S_(WL))和验证区间(VI),分别与厂家声明的批内_不精密度(σ_R)和实验室_(内不)精密度(σ_(WL_))进_行比较_(,如)果S_(_R)≤σ_R、S_(WL)≤σ_(WL),则精密度验证通过;如果测量均值(■)在VI内,则正确度验证通过。结果荧光定量PCR法测定HBV-DNA的结果通过Grubbs′_法离群值检查,无离群_值。高浓度水平的S__(R()0.87%)≤σ__(R()5.00%)、S_(WL)(1_.60%)≤σ_(W_L)(5.00%);_(低浓)度水平的S_R(3_(.7)9%)≤σ_R(5.00%)、S_(WL)(4.83%)≤σ_(WL)(5.00%);高、低浓度水平■分别为6.54、3.15Log IU/mL,均在VI(6.28～7.04、2.74～3.56Log IU/mL)内。结论运用CLSI EP15-A3验证荧光定量_PCR_(法测)定的HBV-DNA的精密度和正确度性能,高、低2个浓度水平的S_R与S_(WL)符合厂家声明要求,测量均值在VI内,精密度和正确度验证通过。

• 单位
  深圳市罗湖区人民医院科研成果展示