H9N2亚型禽流感病毒HA基因的克隆及其DNA疫苗的动物免疫试验

作者：何宏轩; 秦曦明; 张强哲; 汤义; 刘丽艳; 郑昌学; 段明星

来源：生物化学与生物物理进展, 2004, (02): 163-166.

• 禽流感病毒
• 血凝素基因
• RT-PCR
• 克隆
• DNA疫苗 avian influenza virus(AIV)
• HA gene
• RT PCR
• cloning
• DNA vaccine

血凝素 (HA)是决定禽流感病毒的毒力强弱和免疫原性的主要蛋白质 .根据已发表的H9亚型AIV的HA基因序列 ,设计合成了 1对H9HA特异引物 ,以AIVA/Chicken/Henan/ 1 / 1 999/ (H9N2 )核酸为模板 ,通过RT PCR扩增出 1条 1 6kbcDNA片段 .将HA基因插入pVAX1中 ,构建了真核表达质粒pVAX H9.采用活体电击法免疫 3周龄SPF鸡 1 0只 ,剂量为 5 0 μg/只 ,3周后加强免疫一次 ,5周后以 1 0 0倍鸡胚感染剂量 (EID)的HA基因同源病毒对所有鸡进行攻毒 .其间每周检测抗体水平变化 ,6周后以棉拭子进行泄殖腔病毒...

• 单位
  河南职业技术师范学院; 膜生物学国家重点实验室