摘要
目的研究新狼毒素A(Neochamae jasmin A,NCA)在体外对小鼠黑色素瘤B16F10细胞糖代谢及迁移的影响。方法采用黄酰罗丹明B(SRB)法检测NCA对细胞增殖的影响;采用划痕实验检测NCA对细胞迁移的影响;利用试剂盒检测NCA对B16F10细胞中乳酸(LD)水平、葡萄糖摄取量和ATP含量的改变及对己糖激酶(HK)、丙酮酸激酶(PK)和乳酸脱氢酶(LDH)活性的影响;利用RT-PCR法检测糖酵解及迁移相关基因的表达。结果 NCA显著抑制小鼠黑色素瘤B16F10细胞增殖和细胞划痕愈合,下调MMP-2和MMP-9 mRNA的表达,上调TIMP-1、TIMP-2mRNA的表达;下调GLUT1、PKM2、LDHA mRNA的表达,浓度依赖性的抑制ATP的产生和乳酸的释放,减少葡萄糖的摄取,降低糖酵解关键酶HK、PK、LDH的活性。结论推测NCA抑制B16F10细胞增殖和迁移可能与调节肿瘤细胞糖酵解有一定相关性。
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