摘要
目的检测中波紫外线(UVB)照射对系统性红斑狼疮(SLE)患者的外周血单个核细胞(PBMC)自噬相关mRNA表达的影响并验证。方法分离15例SLE患者和15例正常对照的PBMC,各分为UVB照射组和未照射组,照射UVB后培养24 h,提取细胞总RNA,使用RNA-Seq测序,筛选出各组间自噬相关差异性表达mRNA,并通过qPCR及Western blot对部分基因(ATG7、p62/SQSTM1)的表达情况进行验证。结果 RNA-Seq显示SLE患者未照射UVB组(SLE-C组)和正常人未照射UVB组(NC-C组)相比,共有266个基因上调,85个基因下调;SLE患者照射UVB组(SLE-UVB组)和正常人照射UVB组(NC-UVB组)相比,共有318个基因上调,146个基因下调;GO功能富集分析显示差异基因与自噬小体组装、巨自噬的正性调节、巨自噬的调节等有关。对ATG7和p62进行RT-qPCR和Western blot验证,结果显示ATG7和p62在SLE-UVB组的表达水平较SLE-C组和NC-UVB组高,与RNA-Seq的变化趋势一致。结论获得SLE患者PBMC照射UVB前后的自噬相关mRNA表达数据,为进一步阐明UVB对SLE发病的影响提供了理论基础。
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单位中国人民解放军成都军区总医院; 昆明医科大学第二附属医院