基于斑马鱼模型的续断抗骨质疏松活性部位筛选

作者：景莉君; 王长梅; 韦英杰; 贾晓斌; 谢林

来源：中药材, 2014, 37(04): 635-640.

DOI：10.13863/j.issn1001-4454.2014.04.033

• 斑马鱼
• 骨质疏松
• 续断
• 活性部位
• 筛选

目的:利用泼尼松龙诱导的斑马鱼骨质疏松模型筛选续断抗骨质疏松活性部位,探讨斑马鱼骨质疏松模型的适用性与合理性。方法:将受精后5 d的斑马鱼幼鱼暴露在25μmol/L泼尼松龙溶液、0.5%DMSO的培养基中,48 h后将25μmol/L泼尼松龙溶液更换为含25μmol/L泼尼松龙的不同浓度续断总提物及其大孔树脂不同浓度醇洗脱部位(含生药0.025、0.25、2.5、25μg/mL)溶液中,同时保留一组25μmol/L泼尼松龙组作为模型对照组。28.5℃下在24孔板中培养,每天换液至第10 d处死。采用茜素红对培养10天的各组斑马鱼幼鱼骨骼染色,并以显微检测、数码成像方法定量分析骨骼染色区域。结果:与DMSO溶媒阴性对照组比较,25μmol/L泼尼松龙模型组的斑马鱼头部骨骼染色面积和染色光密度值显著减少;与模型组比较,除续断大孔树脂水与10%乙醇洗脱部位外,续断总提物及其大孔树脂30%、50%、70%、90%乙醇洗脱部位的斑马鱼头部骨骼染色面积和染色光密度值显著增加。色谱分析表明30%、50%、70%、90%乙醇洗脱部位即含皂苷类成分又含非皂苷类成分。结论:续断皂苷类和非皂苷类成分均能阻止泼尼松龙诱导的斑马鱼骨丢失。斑马鱼骨质疏松模型成功用于高效筛选中药续断的抗骨质疏松活性部位,具简单、高效及可操作性强的优势。

• 单位
  中国中医科学院; 南京中医药大学; 江苏省中医药研究院; 国家中医药管理局