非洲猪瘟病毒p17蛋白单克隆抗体的制备与鉴定

作者：白晶晶; 宋欢欢; 白晨雨; 郝丽影; 颜世君; 杜萌萌; 李向东; 邓均华^*; 田克恭^*

来源：河南农业科学, 2020, 49(12): 137-143.

DOI：10.15933/j.cnki.1004-3268.2020.12.020

• 非洲猪瘟病毒
• p17蛋白
• 杆状病毒表达系统
• 单克隆抗体
• 间接免疫荧光试验

为研发非洲猪瘟病毒(ASFV)的免疫学诊断试剂,利用杆状病毒表达系统表达了重组ASFV p17蛋白并纯化,然后将其免疫BALB/c小鼠,之后将高血清抗体效价小鼠的脾细胞融合骨髓瘤细胞,通过间接ELISA方法筛选阳性杂交瘤细胞,筛选到16株能稳定分泌抗p17蛋白特异性单克隆抗体的杂交瘤细胞株,其腹水的效价均介于1∶2.560×106～1∶1.024×107。抗体亚类鉴定结果显示,6株单克隆抗体(6H6、4D1、7E8、3D1、2F4和2B4)的重链亚类均为IgG1,其余10株单克隆抗体(7H12、10H6、10F3、6E11、4B3、5F7、7H9、6C4、2F1和4H7)的重链亚类均为IgG2a,所有单克隆抗体的轻链亚类均为κ链;IFA鉴定结果表明,共有8株单克隆抗体可特异性识别ASFV。综上,成功制备了ASFV p17蛋白单克隆抗体。