hPNAS-4腺病毒载体的构建及其体外抗肿瘤作用

作者：倪睿; 严飞; 袁铸; 李炯; 文艳君

来源：四川大学学报(自然科学版), 2009, (05): 1537-1542.

• PNAS-4
• 基因治疗
• 腺病毒
• 肿瘤
• 凋亡 PNAS-4
• gene therapy
• adenovirus
• tumor
• apoptosis

用RT-PCR从A293细胞中克隆hPNAS-4编码区cDNA,将其酶切后连接至pEN-TRll载体上,再通过同源重组作用将hPNAS-4基因片段重组至腺病毒骨架载体上,构建腺病毒重组质粒,最后经293细胞的包装扩增后得到携带hPNAS-4基因的重组腺病毒;将重组腺病毒体外感染人肺癌A549细胞;RT-PCR测得感染细胞中hPNAs-4表达明显上调,MTT测得细胞增殖受到明显抑制,流式细胞仪测得细胞凋亡率明显升高,琼脂糖凝胶电泳显示其基因组DNA有明显的梯状条带.以上结果表明hPNAS-4过表达对A549肿瘤细胞的生长有明显的抑制和诱导凋亡作用.

• 单位
  生命科学学院; 四川大学华西医院; 四川大学; 生物治疗国家重点实验室