纳米磁珠联合PCR检测甘蔗杆状病毒方法的建立和初步应用

作者：李书巧; 王坤; 陈开闯; 王凤林; 陈保善; 温荣辉^*

来源：分子植物育种, 2020, 18(07): 2268-2272.

DOI：10.13271/j.mpb.018.002268

• 甘蔗杆状病毒
• 纳米磁珠
• PCR检测
• 核酸自动提取仪

本研究通过对DNA提取裂解液的成分和用量以及裂解时间等因素进行系统优化,建立了一种高通量的磁珠法提取甘蔗总DNA,再进行PCR检测甘蔗杆状病毒(SCBV)的方法。采用核酸自动提取仪,应用纳米磁珠提取甘蔗总DNA,经PCR检测甘蔗杆状病毒,并与以试剂盒提取DNA为模板的PCR检测结果进行比较。结果显示,经优化的裂解液成分为EDTA·Na20.08 mol/L、NaCl 0.8 mol/L、SDS 2%和Tris-HCl0.10 mol/L,裂解时间为20 min,可用于纳米磁珠提取甘蔗总DNA进行SCBV检测。所建立的方法通量高、成本低、耗时短,可用于SCBV的批量检测。

• 单位
  广西大学; 亚热带农业生物资源保护与利用国家重点实验室