表达萤光素酶的HIV药物筛选细胞模型的建立

作者：张昕; 安小平; 陈斌; 张宝中; 王盛; 刘大斌; 童贻刚

来源：生物技术通讯, 2010, (05): 666-669.

• 人免疫缺陷病毒
• 假型慢病毒
• 单次复制
• 药物筛选 human immunodeficiency virus
• pseudo-typed lentivirus
• singly cycle replication
• drug screening

目的:构建基于萤光素酶的单次复制人免疫缺陷病毒(HIV)细胞模型,用于抗HIV药物的筛选。方法:构建含萤光素酶报告基因的假型慢病毒质粒,将疱疹性口炎病毒外膜糖蛋白(VSV-G)的表达质粒、HIV-1 Rev蛋白表达质粒、HIV Gag-Pol蛋白表达质粒和含萤光素酶报告基因的重组慢病毒质粒共转染HEK 293FT细胞,制备假型慢病毒;在假型慢病毒生产和再感染新鲜HEK 293FT细胞的过程中加入逆转录酶和蛋白酶抑制剂(如AZT),检测再感染的细胞中萤光素酶的表达水平,从而判断药物对HIV的抑制作用。结果:构建了含萤光素酶报告基因的重组慢病毒质粒pLenti-Luc;利用已知抗HIV药物AZT进...

• 单位
  病原微生物生物安全国家重点实验室; 军事医学科学院