绿原酸致RBL-2H3细胞脱颗粒反应及机制研究

作者：申茜; 李珍; 王玉; 郭梦情; 庄朋伟; 张艳军; 郭虹^*

来源：药物评价研究, 2023, 46(02): 305-310.

• 绿原酸
• RBL-2H3细胞
• 脱颗粒
• 类过敏反应
• β-氨基己糖苷酶
• 组胺
• 类胰蛋白酶
• 细胞外调节蛋白激酶(ERK1)
• p38丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)

目的 研究绿原酸对大鼠嗜碱性白血病细胞RBL-2H3脱颗粒作用及可能机制。方法 将不同质量浓度（3.125、6.250、12.500、25.000、50.000、100.000、200.000μg·mL-1）的绿原酸作用于RBL-2H3细胞，通过实时细胞分析（RTCA）系统检测绿原酸干预后引起的细胞指数（CI）值变化，以评价RBL-2H3细胞脱颗粒情况；利用甲苯胺蓝染色观察细胞形态变化；化学荧光法测定组胺释放率；底物显色法测定β-氨基己糖苷酶释放率、类胰蛋白酶释放量；网络药理学预测绿原酸诱导RBL-2H3细胞脱颗粒的潜在机制，并应用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)对预测通路的主要靶点细胞外调节蛋白激酶（ERK1）、c-Jun氨基末端激酶（JNK）、p38丝裂原活化蛋白激酶（MAPK）mRNA水平进行检测。结果 绿原酸质量浓度≥6.25μg·mL-1时，可使RBL-2H3细胞的CI值在给药20 min后呈现先快速上升后下降的趋势；绿原酸质量浓度≥12.5μg·mL-1时，RBL-2H3细胞逐渐变圆甚至呈现多边形；与对照组比较，β-氨基己糖苷酶、组胺和类胰蛋白酶的释放量显著增加（P<0.05、0.01、0.001）。网络药理学预测发现，绿原酸致细胞脱颗粒作用可能与MAPK、磷脂酰肌醇3-激酶（PI3K）/蛋白激酶B (Akt)等信号通路相关；qRT-PCR结果证实，与对照组比较，绿原酸可显著增加ERK1、p38 MAPK mRNA表达（P<0.05、0.01），但对JNK mRNA表达影响不显著。结论 绿原酸可通过激活ERK1、p38 MAPK通路诱导RBL-2H3细胞发生脱颗粒，具有潜在的诱发类过敏反应作用。

• 单位
  天津中医药大学第一附属医院; 天津中医药大学