摘要
目的 探讨IL-33通过对NF-κB信号通路及炎症因子的调控,对肝癌HepG2细胞增殖和迁移的影响。方法 RT-PCR检测IL-33在不同肝癌细胞系中的表达,Western Blot检测IL-33对HepG2细胞NF-κB信号通路激活相关蛋白(NF-κB、p-NF-κB、IKB、p-IKB)的调控,ELISA检测IL-33对HepG2细胞中IL-1α、IL-1β、IL-6、IL-18等炎症因子释放的调控,EdU增殖实验检测IL-33对HepG2细胞增殖的影响,CCK8实验检测IL-33对HepG2细胞24 h和48 h活力的影响,Transwell小室实验和划痕实验检测IL-33对HepG2细胞迁移的影响。结果 IL-33 mRNA表达分别为LO2(1.01±0.01)、MHCC97H(1.08±0.05)、LM3(1.76±0.21)、HepG2(3.88±0.35)、SMCC7721(2.24±0.43)和Hep3B(2.13±0.30),差异有统计学意义(F=19.621,P=0.001)。IL-33处理24 h组中IL-1α(3185.25±194.67)、IL-1β(2103.69±124.75)、IL-6(446.58±36.82)、IL-18(1492.60±180.31),高于对照组的1001.58±18.65、1642.81±45.66、151.34±20.13、915.48±36.15,差异有统计学意义(P<0.05)。IL-33处理24 h组中NF-κB磷酸化蛋白(4.53±0.36)及IKB磷酸化蛋白(2.76±0.28)相对表达水平均高于对照组(1.25±0.23、0.49±0.09),差异有统计学意义(P<0.05)。IL-33处理24 h组细胞增殖(1.41±0.08)、24 h细胞活力(135.69±6.88)%、48 h细胞活力(176.34±25.69)%,高于对照组的(0.86±0.04)、(98.65±1.05)%、(119.89±10.86)%,差异有统计学意义(t=13.750,P<0.01;t=9.218,P<0.01;t=3.506,P=0.017)。Transwell小室和划痕实验结果发现,IL-33处理24 h组细胞侵袭数量(256.38±10.11)个、迁移相对距离(0.74±0.05),高于对照组的(185.63±23.54)个、(0.45±0.12),差异有统计学意义(t=4.783,P=0.005;t=3.864,P=0.012)。结论 IL-33可通过调控NF-κB信号通路及炎症因子等的分泌,进而促进肝癌HepG2细胞增殖和迁移。
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单位铜川市人民医院; 北京中医药大学东直门医院