猫疱疹病毒ERA-LFD检测技术的建立与应用

作者：刘迪; 许鑫燕; 郑亚婷; 杨育鹏; 康洪涛; 姜骞; 杨鸣发; 刘家森^*; 曲连东^*

来源：中国兽医科学, 2022, 52(01): 11-18.

DOI：10.16656/j.issn.1673-4696.2022.0007

• 猫疱疹病毒
• ERA-LFD
• 快速检测

为建立一种快速检测猫疱疹病毒(FHV)的酶促恒温扩增-横向流动试纸条(ERA-LFD)方法,根据GenBank上FHV TK基因保守区域序列,设计多对ERA特异性引物用于筛选最佳引物对及探针,以现场快速检测FHV。灵敏性试验表明,该方法的检测限为7.86×101copies/μL,比普通PCR的检测下限高10倍,与实时荧光定量PCR方法的检测限相当。特异性试验表明,该检测方法与猫细小病毒、猫杯状病毒、猫传染性腹膜炎病毒等无交叉反应。重复性试验表明,组内的变异系数在1.15%～4.76%之间,组间变异系数在2.09%～2.66%之间,均小于5%。对30份临床样品进行检测,该方法的阳性检出数为6,包含用普通PCR方法的检出的5份阳性病料。对临床检测为阳性的ERA扩增产物进行测序,BLAST对比结果证实为FHV毒株。综上所述,建立的ERA-LFD方法可用于猫疱疹病毒的快速检测及流行病学调查。

• 单位
  东北农业大学; 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所; 兽医生物技术国家重点实验室