黄芩苷通过调控细胞自噬抑制鼻咽癌细胞增殖

作者：苏芮; 邹攀; 朱镇华; 何迎春

来源：生命的化学, 2022, 42(02): 361-370.

DOI：10.13488/j.smhx.20210593

• 黄芩苷
• 鼻咽癌
• 增殖
• 自噬

本实验旨在探讨黄芩苷(baicalin,Bai)通过调控细胞自噬对抑制鼻咽癌CNE2细胞增殖的影响。我们采用了CCK-8法检测不同浓度黄芩苷(5μmol/L、10μmol/L、20μmol/L、40μmol/L)在12 h、24h、36 h、48 h对CNE2细胞增殖的作用;实时无标记细胞功能分析技术(real-time unlabeled cell function analysis technique,RTCA)、高通量细胞成像多功能检测系统(CytationTM5,C5)监测黄芩苷对CNE2细胞增殖数量的变化;单丹磺酰尸胺(dansylcadaverine,MDC)染色法检测黄芩苷对CNE2细胞自噬的影响;蛋白质免疫印迹(Western Blot)检测黄芩苷对CNE2细胞增殖和自噬相关蛋白表达的影响。CCK-8结果显示,黄芩苷可抑制CNE2增殖(P<0.05或P<0.01),且随浓度升高,抑制作用增强;RTCA、C5监测结果显示,黄芩苷能有效抑制CNE2细胞增殖(P<0.05或P<0.01),且在24 h抑制率最为明显(P<0.05);Western Blot结果表明,与对照组相比,黄芩苷下调了增殖相关蛋白PCNA的表达(P<0.05)。MDC染色法结果显示,与对照组相比,不同浓度的黄芩苷处理CNE2细胞后荧光强度均减弱(P<0.05),黄芩苷40μmol/L浓度荧光强度最小(P<0.01);Western Blot结果表明,与对照组相比,黄芩苷干预CNE2细胞后自噬相关蛋白LC3Ⅱ/Ⅰ和Beclin1表达下调、P62表达上调(P<0.05)。加入自噬激活剂(雷帕霉素、rapamycin、RAPA)后,黄芩苷对鼻咽癌细胞的抑制作用减弱(P<0.05),MDC染色观察发现荧光强度增强(P<0.01),且自噬相关蛋白LC3Ⅱ/Ⅰ和Beclin1表达上调、P62表达下调、增殖蛋白PCNA表达上调(P<0.01)。因此,本实验研究结果表明,黄芩苷能够抑制鼻咽癌CNE2细胞自噬,并通过抑制细胞自噬进一步抑制鼻咽癌CNE2细胞增殖。

• 单位
  湖南中医药大学