摘要

目的制备不同浓度的氧化石墨烯(GO)/聚己内酯(PCL)复合基质纳米材料,观察其在体外对大鼠棕色脂肪干细胞(BASC)成心肌分化的影响。方法利用静电纺丝技术制备GO/PCL复合纳米纤维材料。通过将BASC接种于纯PCL和GO/PCL复合纳米纤维上培养后进行CCK-8法测试、对纳米材料的扫描电镜(SEM)检测及电导率测定,表征GO/PCL复合纳米材料的生物相容性及性状特征。采用细胞学、免疫荧光染色等方法,检测心肌细胞相关蛋白的表达情况,系统评价GO/PCL复合材料对BASC活力、增殖及成心肌分化效率的影响。结果该GO/PCL复合基质纳米材料在GO浓度为0.1 mg/ml时无明显细胞毒性。蛋白荧光统计结果表明,与PCL组相比,GO/PCL组细胞的心肌细胞特异蛋白α-辅肌动蛋白(α-actinin)及闰盘相关蛋白缝隙连接蛋白-43(connexin-43,CX-43)表达水平显著提高(P<0.05)。细胞骨架染色结果表明,与PCL组相比,GO/PCL组的细胞表现出类似天然心肌细胞束的长梭样伸展,且生长方向具有一定的极性。结论本研究成功制备了GO/PCL复合纳米材料。该GO/PCL复合纳米材料可促进BASC向心肌细胞分化,并促进闰盘相关蛋白的表达。