反义DNMT3b基因真核表达载体转染对人胆管癌细胞DNMT3b基因表达的影响

作者：左石; 郭伟; 刘民锋; 董泾青; 徐立宁; 罗剑; 邹声泉

来源：中国普外基础与临床杂志, 2006, (01): 56-60.

• DNA甲基转移酶3b
• 反义RNA
• 转染
• 基因表达
• 胆管癌

目的观察反义DNA甲基转移酶3b(DNMT3b)基因真核表达载体转染对人胆管癌QBC939细胞中DNMT3b基因表达的影响。方法构建反义DNMT3b基因真核表达载体,通过脂质体转染到人胆管癌细胞株QBC939中,G418筛选得到稳定转染细胞株,PCR鉴定外源性neoR基因在转染细胞中的表达以确定转染是否成功。半定量RTPCR观察转染前后DNMT3b基因mRNA水平的变化,流式细胞术检测转染前后DNMT3b蛋白的变化。结果反义DNMT3b基因真核表达载体转染能使人胆管癌QBC939细胞中DNMT3b基因的mRNA水平从0.956±0.053降低至0.209±0.023,差异有统计学意义(P<0.01);流式细胞术检测结果显示,DNMT3b蛋白水平从(75.38±3.22)%降低到(29.87±3.46)%,差异有统计学意义(P<0.01)。结论反义DNMT3b基因转染能降低人胆管癌QBC939细胞中DNMT3b基因的表达水平,为研究DNMT3b基因功能及其在胆管癌细胞中的作用提供了方法和实验依据。

• 单位
  华中科技大学同济医学院附属同济医院