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摘要
脂多糖（LPS）是多杀性巴氏杆菌（Pm）关键的毒力因子，在其致病机制中发挥重要作用。为了探究不同血清型Pm LPS对宿主细胞的致病机制，本实验将从D型和A型Pm中提取的LPS(D-LPS和A-LPS)分别以1μg/mL刺激羊支气管上皮细胞6 h后裂解各组细胞，采用Illumina HiSeq测序平台进行转录组测序，将测序数据处理后获得转录水平差异基因，利用GO和KEGG数据库对转录差异基因进行GO功能注释与KEGG富集分析，并利用RTqPCR对转录组测序中的转录差异基因进行验证。结果显示：D-LPS组筛选出转录水平上调的基因62个，下调的基因24个，A-LPS组筛选出转录水平上调的基因27个，下调的基因29个，两组相同转录差异基因6个；转录差异基因的GO功能注释结果显示，D-LPS组中共显著富集到243个GO term，包括146个生物学过程（BP）、44个细胞组分（CC）、53个生物学功能（MF），且显著富集的生物学过程有ATP生物合成过程、NADH脱氢酶活性和RAGE受体结合等；A-LPS组中共显著富集到167个GO term，包括109个BP、19个CC、39个MF，且显著富集的生物学过程有IL-11受体结合、GTP酶活性、磷脂酶A2活性和尿嘧啶分解代谢过程等；KEGG富集分析结果显示，D-LPS组中的转录差异基因显著富集到氧化磷酸化、产热以及ECM-受体相互作用途径等通路，A-LPS组中的转录差异基因显著富集到Ras信号通路以及泛酸和辅酶A生物合成等通路。从上述两组中随机选取13个转录差异基因进行RT-qPCR验证，结果与测序结果基本一致。本研究首次分析了两种不同血清型Pm LPS刺激羊支气管上皮细胞后转录组测序数据的变化，结果表明两种Pm LPS均主要影响羊支气管上皮细胞免疫、细胞增殖分化、能量产生及代谢等信号通路，为研究LPS在Pm对宿主致病机制中的作用奠定了基础，同时也为Pm LPS疫苗的研发提供参考依据。
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