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摘要
目的 探讨肿瘤坏死因子-α(TNF-α)调节血管平滑肌细胞（VSMC）向巨噬细胞表型转化及其在静脉血栓管壁重塑中的作用及相关机制。方法 选取2020年6—12月上海交通大学医学院附属第九人民医院收治的16例患者为研究对象，以血栓累及下肢浅静脉中膜部分作为试验组，邻近未受血栓累及的正常浅静脉中膜部分作为对照组，将16例血栓性浅静脉炎患者中的6例进行基因芯片分析，剩余10例患者进行巨噬细胞表型标志物mRNA的检测。并于上海交通大学医学院实验动物中心获得清洁级雄性SD大鼠22只进行动物实验，下腔静脉血栓造模成功的SD大鼠随机分为血栓组（n=12）和实验组（n=10）。收集人血栓性静脉炎静脉管壁组织，通过基因芯片和逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）检测人静脉管壁VSMC巨噬细胞样表型标志物mRNA的表达。TNF-α作用人脐静脉平滑肌细胞（HUVSMC）3～4 d后，使用RT-PCR检测HUVSMC收缩表型、合成表型及巨噬细胞样表型标志物mRNA的表达。构建SD大鼠下腔静脉血栓模型，TNF-α局部处理血栓段静脉管壁24～48 h后，使用RT-PCR检测各组静脉管壁VSMC收缩表型、合成表型及巨噬细胞样表型标志物mRNA的表达。结果 试验组人静脉管壁中膜巨噬细胞表型标志物白细胞分化抗原68(CD68)mRNA表达高于对照组，差异有统计学意义（P <0.05）。TNF-α作用HUVSMC 3～4 d后，试验组收缩表型α2-肌动蛋白（ACTA2）、转凝蛋白（TAGLN）和合成表型标志物I型胶原蛋白α1链（COL1A1）mRNA均低于对照组，差异均有统计学意义（P <0.05），其中收缩表型标志物的mRNA变化更为明显；TNF-α作用HUVSMC后，试验组巨噬细胞表型相关标志物CD68、半乳糖凝集素3(LGALS3)和炎症因子标志物肿瘤坏死因子（TNF）mRNA均明显高于对照组，差异均有统计学意义（P <0.05）。TNF-α处理下腔静脉血栓形成静脉管壁24 h后，实验组大鼠静脉管壁VSMC表型标志物中Tagln mRNA表达明显低于血栓组，差异有统计学意义（P <0.01），而两组大鼠Acta2、Col1a1 mRNA表达比较，差异均无统计学意义（P> 0.05）。TNF-α处理下腔静脉血栓形成静脉管壁24 h后，实验组大鼠巨噬细胞表型标志物Cd68、Lgals3、Tnf mRNA均明显高于血栓组，差异均有统计学意义（P <0.01）;TNF-α处理下腔静脉血栓形成静脉管壁48 h后，实验组大鼠巨噬细胞表型标志物分子Cd68、Lgals3 mRNA表达均明显低于血栓组，差异均有统计学意义（P <0.01），而Tnf mRNA表达明显高于血栓组（P <0.01）。结论 血栓形成后静脉管壁VSMC可在TNF-α刺激下向巨噬细胞样表型转化，且该巨噬细胞样VSMC拥有分泌TNF-α的能力，并可能成为管壁炎症反应的重要细胞来源，加重炎症反应，为血栓形成后综合征（PTS）的防治干预靶点提供新策略。
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