摘要
目的研究干细胞表面标记CD24基因对根尖牙乳头干细胞成骨分化能力的影响。方法利用CD24 shRNA基因敲除CD24进行丧失性功能研究;实时定量RT-PCR检测CD24的基因敲除效果;通过碱性磷酸酶(ALP)活性检测、茜素红染色及钙离子定量分析明确根尖牙乳头干细胞体外成骨分化能力的变化;实时荧光定量RT-PCR检测成骨分化相关基因-Ⅰ型胶原蛋白1A、Ⅰ型胶原蛋白1B、骨涎蛋白、骨桥蛋白和成骨相关转录因子RUNX2的表达,分析研究根尖牙乳头干细胞基因表达的改变。结果实时定量RT-PCR结果显示CD24可以在根尖牙乳头干细胞有效的被敲除;碱性磷酸酶ALP活性结果显示敲除CD24抑制根尖牙乳头干细胞碱性磷酸酶ALP活性;茜素红染色及钙离子定量分析结果显示敲除CD24明显抑制根尖牙乳头干细胞体外矿化能力;实时定量RT-PCR结果显示敲除CD24明显抑制I型胶原蛋白1A、Ⅰ型胶原蛋白1B、骨涎蛋白、骨桥蛋白和RUNX2的表达。结论基因沉默CD24可以通过抑制转录因子RUNX2及成骨分化基因的表达,从而抑制根尖牙乳头干细胞体外成骨分化功能。
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单位中国康复研究中心北京博爱医院; 首都医科大学附属北京口腔医院; 首都医科大学