猪圆环病毒2型感染性DNA的构建及病毒拯救

作者：杨顺利; 尹双辉; 沈小燕; 尚佑军; 刘湘涛

来源：中国兽医学报, 2011, (02): 169-173+188.

DOI：10.16303/j.cnki.1005-4545.2011.02.007

• 猪圆环病毒2型
• 感染性克隆
• 病毒拯救 porcine circovirus typeⅡ
• infectious clone
• virus rescue

用PCR法扩增猪圆环病毒Ⅱ型(PCV2)全长基因组。将全基因组插入到真核生物表达载体PcDNA3.1的多克隆位点中,获得单拷贝重组质粒P-PCV2和串连双拷贝重组质粒p-2PCV2,将所得质粒分别转染无PCV污染的PK-15细胞系,经7次连续传代后,间接免疫荧光试验显示在细胞中含有病毒抗原。提取mRNA后经RT-PCR检测都有PCV2特异性基因转录。免疫小鼠后,对免疫后不同天数小鼠的血清用ELISA检测,结果到免疫后35 d病毒几乎都能检测到衣壳蛋白特异性抗体,小鼠致死后在其体内也能检测到病毒DNA。结果表明,所构建的2种重组质粒均可表达并在体外组装出有感染性PCV2病毒粒子。为进行PCV2分...

• 单位
  家畜疫病病原生物学国家重点实验室; 中国农业科学院兰州兽医研究所; 农业部