斯钙素2基因调控肝癌细胞增殖凋亡的机制

作者：余计赏; 谭国钳; 吴帆^*; 王百林

来源：中华实验外科杂志, 2020, 37(10): 1812-1814.

• 肝细胞癌
• 斯钙素2
• 增殖
• 凋亡

目的探讨斯钙素2(STC2)基因对肝癌细胞增殖凋亡的影响并初步分析其分子作用机制。方法 2018年4月至2019年3月, 采用慢病毒介导的小干扰RNA(siRNA)技术构建STC2敲减组和对照组SMMC-7721肝癌细胞株(购自中国科学院生化与细胞研究所), 应用黄色噻唑蓝(MTT)生长曲线、细胞周期测定、克隆形成实验和膜联蛋白V-别藻蓝蛋白荧光素(Annexin V-APC)染色法检测两组细胞增殖凋亡的差异, 采用荧光实时定量PCR阵列(PCR Array)技术检测92个增殖凋亡相关基因在两组细胞中的表达水平差异, 并且应用荧光实时定量PCR法(RT-qPCR)验证差异表达的基因, 两组比较采用t检验。结果 STC2敲减组SMMC-7721肝癌细胞中的STC2基因表达量明显低于对照组(0.472±0.041比1.003±0.091, t=9.207, P<0.01), STC2敲减组细胞的增殖速率明显低于对照组(3.090±0.045比4.190±0.052, t=27.218, P<0.01), 其集落形成数目也明显低于对照组(96.670±4.163比161.000±3.606, t=20.232, P<0.01)。STC2敲减组细胞的凋亡水平明显高于对照组[(17.113±0.350)%比(6.397±0.350)%, t=37.546, P<0.01]。与对照组比较, STC2敲减组细胞处于G0～G1期的细胞比例稍增多[(67.183±0.945)%比(64.500±0.341)%, t=4.625, P<0.05], S期的细胞比例则稍减少[(29.360±0.403)%比(30.777±0.640)%, t=3.243, P<0.05], G2～M期细胞比例未见明显差异[(3.457±0.558)%比(4.723±0.598)%, t=2.684, P>0.05]。PCR Array筛选和RT-qPCR验证的结果显示, STC2敲减组细胞中凋亡蛋白酶激活因子-1(APAF1)、第10号染色体同源缺失性磷酸酶-张力蛋白同源基因(PTEN)、腺瘤性结肠息肉病基因(APC)的表达水平明显高于对照组(APAF1:2.49±0.29比1.00±0.03, t=8.724, P<0.05;PTEN:2.10±0.15比1.00±0.06, t=11.888, P<0.01;APC:2.59±0.14比1.00±0.05, t=18.113, P<0.01)。结论 STC2基因可能通过抑制APAF1、PTEN和APC等基因的表达而发挥其调控肝癌细胞增殖凋亡的作用。

• 单位
  暨南大学附属广州红十字会医院