钙离子浓度对脂肪干细胞增殖和成肌分化的影响

作者：陈皓; 柯晨; 张梓凯; 李力群; 林明^*

来源：现代生物医学进展, 2022, 22(07): 1206-1210.

DOI：10.13241/j.cnki.pmb.2022.07.002

• 钙离子
• 脂肪干细胞
• 成肌分化
• 细胞增殖
• 表面特异性抗原

目的：本研究旨在探讨钙离子浓度对脂肪干细胞(ADSCs)增殖和成肌分化的影响。方法：利用抽脂手术废弃脂肪提取脂肪干细胞，进行体外细胞培养和鉴定。设立正常细胞培养液为对照组，在培养液中添加不同浓度的钙离子(分别为0.001 mol/mL、0.002 mol/mL、0.003 mol/mL、0.004 mol/mL、0.005 mol/mL共5组)为实验组，测定在48 h和96 h条件下不同浓度钙离子(Ca2+)对cck8反应细胞增殖的影响。同时通过TGF-β诱导成肌分化，测定不同钙离子浓度下Ca2+信号相关蛋白的表达，并通过CCK-8检测评价其分化水平。另外通过免疫荧光和PCR检测细胞表面特异性抗原(α-SMA,SMMHC)的表达水平。各组间比较应用独立样本t检验，P<0.05为差异具有统计学意义。结果：显微镜下观察可见原代ADSCs细胞培养0.5天后贴壁生长，形态呈圆或椭圆形，而TGF-β诱导ADSCs成肌分化可见细胞呈梭形；实验组中，钙浓度<0.002 mmol/mL时，脂肪干细胞增殖得到显著促进(t=10.08,df=10,P<0.05)；钙浓度<0.003 mmol/mL时，脂肪干细胞的成肌分化也显著增加，同时免疫荧光和PCR检测发现低浓度下α-SMA,SMMHC的表达均显著增加(P<0.05)，而高钙浓度下两者均受到抑制(P<0.05)。结论：低钙浓度(钙浓度<0.002 mmol/mL)可显著促进脂肪干细胞增殖和成肌分化，而高钙浓度下两者均受到抑制。

• 单位
  温州医科大学附属第二医院; 温州医科大学附属第一医院