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摘要
【目的】从云南烟草黑胫病高发区烟草根际土壤分离对烟草黑胫病菌具有高效拮抗作用的菌株，明确拮抗菌株的分类地位，并进行体外拮抗机理初探，为烟草黑胫病的防治提供生防资源和参考依据。【方法】采用平板对峙法从烟草根际土壤中分离对烟草黑胫病菌具有拮抗作用的菌株，通过生理生化特性及16S rDNA序列分析对具有较强拮抗活性的菌株进行鉴定，并测定生防细菌在体外对烟草疫霉的生物防治活性及作用方式。【结果】从采集的烟草根际土壤样品中共分离出6株对烟草疫霉具有拮抗活性的细菌菌株，其中菌株CD-1表现出最强的拮抗活性，其抑菌带宽度达10.12 mm；根据生理生化特性和16S rDNA序列分析，将该菌株鉴定为地衣芽孢杆菌（Bacillus licheniformis）。菌株CD-1具有广谱抗真菌特性，其胞内和胞外均存在抗真菌物质，其中使用二氯甲烷作为细菌发酵液萃取剂所提取的抗真菌物质的抑制效果最好；在p H 6～8、温度40～80℃时表现出相对稳定的抑制活性；菌株CD-1在NB培养基中培养的上清液提取物和细胞提取物对烟草疫霉均表现出较强的抑制活性，其抑制率分别达76.91%和67.23%；菌株CD-1分泌的抗真菌物质能破坏烟草疫霉的孢子质膜，抑制孢子萌发，其中以抗真菌粗提取物0.4 mg/mL处理烟草疫霉孢子6 h后的孢子失膜率达53.62%，孢子萌发被完全抑制，同时检测到有明显的离子和核酸渗漏。【结论】地衣芽孢杆菌CD-1产生的代谢产物抗菌谱广，抑菌活性强，具有开发成生防菌剂的潜力。
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单位云南农业大学; 云南省烟草公司玉溪市公司; 建筑工程学院
