一种新的波氏琵蝎钠通道毒素SpNaTx2重组表达与鉴定

作者:龙思如; 李子怡; 周雨璇; 赵倩茹; 李奕; 张旭; 尹世金*
来源:徐州工程学院学报(自然科学版), 2021, 36(01): 86-92.
DOI:10.15873/j.cnki.jxit.000399

摘要

从实验室已有的西藏波氏琵蝎尾腺转录组数据库中筛选到一个新的毒素多肽编码基因SpNaTx2,序列比对显示该毒素多肽与类β钠通道毒素Birtoxin家族具有33.33%的序列相似性,具有完全相同的二硫键配对构成,提示其为一种新的类β钠通道毒素.为实现SpNaTx2的重组表达,采用基因工程技术构建pET-28a-SpNaTx2原核重组表达载体,通过包涵体变、复性表达方法对SpNaTx2多肽在大肠杆菌E.coli/Rosetta中进行诱导表达和分离纯化.基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)测定显示纯化的SpNaTx2多肽分子量与其理论值一致,表明成功实现了SpNaTx2多肽的重组表达,为深入研究其结构与功能提供了物质基础.

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