高压氧联合血红蛋白对高糖引起的血管内皮细胞损伤的作用

作者：韩庆林; 钱泳全; 马洪东

来源：华中科技大学学报(医学版), 2022, 51(06): 798-804.

• 高压氧
• 血红蛋白
• 高糖
• 人脐静脉内皮细胞
• 小管生成
• Nrf2/HO-1通路

目的 探究高压氧(HBO)联合血红蛋白(Hb)对高糖诱导的血管内皮细胞活力、侵袭、迁移及小管形成能力的影响及其调控机制。方法 体外培养人脐静脉内皮细胞(HUVECs),CCK-8法检测不同剂量血红蛋白(2、4、6、8、10μmol/L)和高压氧(0.10、0.15、0.20、0.25 Mpa)对HUVECs细胞活力的影响。建立高糖诱导的HUVECs细胞模型，分为6组：对照组(5.5 mmol/L葡萄糖处理48 h),甘露醇组(27.5 mmol/L甘露醇处理48 h),高糖组(33 mmol/L葡萄糖处理48 h),高糖+0.25 Mpa高压氧组，高糖+6μmol/L血红蛋白组，高糖+0.25 Mpa高压氧+6μmol/L血红蛋白组。通过CCK-8法检测细胞活力；乳酸脱氢酶(LDH)试剂盒检测LDH水平；TUNEL染色观察细胞凋亡情况；免疫印迹(Western blot)法检测凋亡相关蛋白表达；划痕实验和Transwell实验分别检测细胞迁移和侵袭能力；小管形成实验检测血管生成；最后通过Western blot检测核因子E2相关因子2(Nrf2)和血红素氧合酶1(HO-1)蛋白表达。结果 随着血红蛋白或高压氧剂量的不断增加，HUVECs细胞活力未发生显著变化。与对照组相比，高糖组HUVECs细胞活力、迁移、侵袭和小管形成能力下降，LDH水平升高，凋亡率增加，且Bcl-2、Nrf2和HO-1蛋白表达减少，Bax和cleaved Caspase-3蛋白表达增加。与高糖组相比，高糖+0.25 Mpa高压氧组和高糖+6μmol/L血红蛋白组细胞活力、迁移、侵袭和小管形成能力升高，LDH水平降低，凋亡率下降，且Bcl-2、Nrf2和HO-1蛋白表达增加，Bax和cleaved Caspase-3蛋白表达减少；而高压氧和血红蛋白两者联合作用时，影响更为显著。结论 高压氧联合血红蛋白促进高糖作用下HUVECs的细胞活力、侵袭、迁移及小管形成能力并抑制细胞凋亡，其机制可能与激活Nrf2/HO-1通路有关。

• 单位
  南通大学附属医院