葛根素对RAW264.7细胞破骨分化的影响

作者：刘春丽; 闫雨娟; 莫礼文; 吴志杰; 张黎^*

来源：中国组织工程研究, 2023, 27(32): 5114-5119.

• 葛根素
• RAW264.7细胞
• 破骨细胞
• 诱导分化
• 骨稳态
• Notch信号通路

背景：葛根素是葛根中含有的一种黄酮类衍生物，其可以预防骨质疏松、促进新骨生成，有望成为治疗骨质破坏相关疾病的潜在药物。目的：观察葛根素对RAW264.7细胞破骨分化能力的影响，探究Notch信号通路在其中的调控作用。方法：将RAW264.7细胞分5组干预培养：对照组加入DMEM高糖培养基；破骨诱导组加入破骨诱导培养基(含巨噬细胞集落刺激因子与核因子κB受体活化因子配体的DMEM高糖培养基)；低、中、高浓度葛根素组分别加入含10,25,50μmol/L葛根素的骨诱导培养基。培养7 d后，采用抗酒石酸酸性磷酸酶染色及F-actin染色评估破骨细胞形成情况，RT-PCR检测破骨细胞形成相关基因的表达，Western blot及RT-PCR检测Notch信号通路相关指标表达。结果与结论：(1)抗酒石酸酸性磷酸酶染色显示，与对照组比较，破骨诱导组破骨细胞形成能力升高(P <0.01)；与破骨诱导组比较，低、中、高剂量葛根素组破骨细胞形成能力降低(P <0.05,P <0.01)，且呈浓度依赖性；(2)F-actin染色显示，与对照组比较，破骨诱导组出现边界清晰的F-actin环；与破骨诱导组比较，各浓度葛根素组细胞F-actin环变小，且呈浓度依赖性；(3)RT-PCR检测显示，与对照组比较，破骨诱导组抗酒石酸酸性磷酸酶、组织蛋白酶K、C-fos mRNA表达升高(P <0.01)；与破骨诱导组比较，各浓度葛根素组酒石酸酸性磷酸酶、组织蛋白酶K、C-fos mRNA表达降低(P <0.01)，且呈浓度依赖性；(4)Western blot及RT-PCR检测显示，与对照组比较，破骨诱导组Notch1、Notch2、Hes1、Jagged1、Jagged2的表达升高(P <0.01)；与破骨诱导组比较，各浓度葛根素组Notch1、Notch2、Hes1、Jagged1、Jagged2的表达降低(P <0.01)，且呈浓度依赖性；(5)结果表明，葛根素通过抑制Notch信号通路来抑制RAW264.7细胞的破骨分化能力。

• 单位
  海南医学院