微小RNA-590-3p靶向叉头框蛋白A2对肿瘤细胞增殖和转移特性的影响

作者：耿玲; 付小春; 耿旭景^*

来源：中华实验外科杂志, 2023, 40(06).

• 微小RNA-590-3p
• 叉头框蛋白A2
• 卵巢癌
• 增殖
• 转移

目的探讨微小RNA(miRNA, miR)-590-3p靶向叉头框蛋白A2(FOXA2)对肿瘤细胞增殖和转移特性的影响。方法采用荧光定量聚合酶链反应(PCR)分析人卵巢上皮细胞HOSEpiC和卵巢癌细胞skov3中miR-590-3p水平;将人浆液性卵巢癌细胞系skov3随机分为对照组和观察组, 分别采用miRNA对照和miR-590-3p抑制剂转染skov3细胞, 72 h后采用细胞计数试剂盒(CCK-8)、克隆形成实验和体外移植瘤实验分析两组细胞的增殖能力;采用Transwell和蛋白质印迹法(Western blot)分析两组细胞迁移、侵袭和上皮间质转化能力;采用生物信息学和双荧光素酶报告基因分析miR-590-3p的靶基因, Western blot分析两组细胞靶基因表达以及增殖和迁移相关蛋白表达水平。计量数据比较采用t检验。结果人卵巢上皮细胞HOSEpiC miR-590-3p表达水平(0.77±0.14)明显低于卵巢癌细胞skov3 miR-590-3p表达水平(1.22±0.15), 差异有统计学意义(t=5.450, P<0.05)。对照组细胞48 h吸光度值(2.06±0.13)明显高于观察组(1.37±0.12), 差异有统计学意义(t=9.279, P<0.05)。对照组细胞克隆形成数量[(125.83±12.19)个]明显高于观察组[(103.67±10.04)个], 差异有统计学意义(t=3.169, P<0.05)。对照组细胞肿瘤体积[(976.68±79.77) mm3]明显高于观察组[(718.60±52.52) mm3], 差异有统计学意义(t=6.619, P<0.05)。对照组细胞肿瘤肿瘤[(4.42±0.51) g]明显高于观察组[(2.74±0.33) g], 差异有统计学意义(t=6.807, P<0.05)。对照组细胞迁移数量[(134.50±9.89)个]明显高于观察组[(108.17±7.63)个], 差异有统计学意义(t=5.163, P<0.05)。对照组细胞侵袭数量[(93.83±5.31)个]明显高于观察组[(73.29±5.21)个], 差异有统计学意义(t=6.414, P<0.05)。对照组细胞上皮细胞标志物E-钙黏蛋白(E-cadherin)表达水平(0.67±0.13)明显低于观察组(1.25±0.12), 差异有统计学意义(t=7.763, P<0.05)。对照组细胞间质细胞标志物β-连环蛋白(β-catenin)和N-钙黏蛋白(N-cadherin)表达水平(1.25±0.12、1.22±0.13)明显高于观察组(0.92±0.06、0.69±0.07), 差异有统计学意义(t=6.091、8.993, P<0.05)。FOXA2是miR-590-3p的靶基因。对照组细胞FOXA2蛋白表达水平(1.21±0.13)明显低于观察组(2.16±0.14), 差异有统计学意义(t=12.200, P<0.05)。结论 miR-590-3p沉默可显著促进靶蛋白FOXA2表达, 抑制卵巢癌细胞增殖和转移能力。

• 单位
  黄淮学院; 郑州大学第二附属医院; 驻马店市中心医院