摘要
目的筛选非病毒载体纳米球对原代肌腱细胞的最佳转染效率以及生物相容性评价。方法制备不同剂量PEI修饰的纳米球, 原代培养鸡、大鼠、小鼠肌腱细胞, 转染不同剂量的siRNA, 转染12 h后对细胞进行荧光拍照与流式细胞仪分析, CCK-8检测转染24、48和72 h后细胞的活力情况, WB检测GAPDH蛋白表达水平, 未转染细胞作为阴性对照, 脂质体作为阳性对照。结果对于鸡、大鼠、小鼠三种原代肌腱细胞, 随着转染试剂剂量的增大, 脂质体的转染效率明显提高, 纳米球的转染效率未见显著改变, 但所有纳米球的转染效率均高于脂质体。相较于脂质体, 纳米球对细胞的初期细胞毒性反应较大, 随着时间的推移, 毒性影响逐渐消失。结论与脂质体相比, 纳米球对于鸡、大鼠、小鼠三种肌腱细胞的转染效率都较高, 纳米球是动物肌腱细胞转染siRNA的理想转染试剂。
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单位南通大学附属医院; 南通大学