1株鲤源致病性铜绿假单胞菌的分离鉴定及药敏试验

作者：邹昊博; 薛淑群; 吕晓楠; 高聪婷; 邴辉; 古今朝; 韩英^*; 夏邦华^*

来源：中国畜牧兽医, 2023, 50(11): 4703-4713.

DOI：10.16431/j.cnki.1671-7236.2023.11.037

• 鲤
• 铜绿假单胞菌
• 药敏试验
• 毒力基因

【目的】分离鉴定导致鲤大量急性死亡的病原菌，确定其毒力基因和药物敏感性，为后续病鲤的临床治疗提供参考。【方法】从病鲤的内脏中分离培养病原菌，并对该菌株进行形态学观察、革兰染色、生理生化鉴定及16S rRNA分子鉴定；采用毒力基因检测、K-B药敏纸片法及人工回归感染试验分析该病原菌的药物敏感性和致病性。【结果】分离菌在LB固体培养基上呈现圆形或椭圆形菌落，镜检为短棒状的革兰阴性菌，具有一定的运动能力。生理生化试验结果显示，分离菌株在D-葡萄糖、明胶、脲酶、氧化酶、精氨酸、鸟氨酸、赖氨酸及柠檬酸试验中均呈阳性反应，其余指标皆呈阴性反应，符合铜绿假单胞菌的生理生化特征。16S rRNA基因序列系统进化树显示，分离菌与铜绿假单胞菌NR＿114471.1呈现高度同源，相似性为99%。综合以上试验结果，将分离菌鉴定为铜绿假单胞菌，命名为HB2210。通过毒力基因检测发现，该菌株含有鞭毛蛋白结构基因fla基因、气溶素aer基因、细胞毒性肠毒素act基因、外膜蛋白ompA基因及热稳定性肠毒素ast基因等多种毒力基因。通过药敏试验发现，分离菌株对头孢他啶、头孢曲松、头孢哌酮、诺氟沙星、氧氟沙星、环丙沙星、多黏菌素B、左氧氟沙星及哌拉西林9种抗菌药敏感。通过人工回归感染试验发现，分离菌对鲤具有急性毒性，高浓度组死亡率高达85%。【结论】本试验从病鲤组织中分离的铜绿假单胞菌HB2210具有极强的致病性，药敏试验筛选出的头孢他啶、头孢曲松、头孢哌酮、诺氟沙星、氧氟沙星、环丙沙星、多黏菌素B、左氧氟沙星及哌拉西林9种抗菌药素可为鲤养殖企业精准用药提供理论基础。

• 单位
  生命科学学院; 中牧实业股份有限公司; 东北农业大学