P2X7R拮抗剂及p38MAPK抑制剂对氧糖剥夺诱导的原代神经元凋亡的影响

作者：张涛; 胡金霞; 张聪慧; 张成; 郝琦; 阴菡菡; 昝坤; 祖洁; 张作慧; 时宏娟; 杨新新; 叶新春; 崔桂云^*

来源：徐州医科大学学报, 2020, 40(04): 235-239.

• 嘌呤能受体
• 拮抗剂
• 氧糖剥夺
• 神经元
• 凋亡

目的探讨嘌呤能P2X7受体(P2X7R)拮抗剂通过p38丝裂原活化蛋白激酶(p38MAPK)在原代神经元氧糖剥夺(OGD)模型中发挥的抗凋亡作用。方法培养C57BL/6J胎鼠大脑皮质原代神经元,构建OGD模型。将原代神经元分为对照组和OGD 0. 5、1、2、3、6 h组,Western blot检测P2X7R的表达变化。再将原代神经元分为对照组、OGD组、OGD+亮蓝G(BBG)、OGD+SB203580组,Western blot检测P2X7R、磷酸化的p38MAPK(p-p38MAPK)、p38MAPK和活化的半胱天冬酶-3(cleaved caspase-3)的蛋白表达,免疫荧光染色检测神经元凋亡。结果 Western blot结果显示:与对照组相比,P2X7R在原代神经元OGD 1、2、3、6 h表达均增加(P <0. 05),3 h表达最高。与对照组相比,OGD组P2X7R、p-p38MAPK和cleaved caspase-3的表达均明显升高(P <0. 05);而与OGD组相比,OGD+BBG组P2X7R、p-p38MAPK和cleaved caspase-3的表达均下降(P <0. 05);与OGD组比较,OGD+SB203580组p-p38MAPK和cleaved caspase-3表达下调(P <0. 05)。免疫荧光染色显示:与对照组相比,OGD组神经元凋亡明显增加(P <0. 05);而与OGD组相比,OGD+BBG组神经元凋亡明显减少(P <0. 05)。荧光强度比值分析显示:与对照组相比,OGD组p38MAPK磷酸化水平明显升高(P <0. 05),BBG和SB203580预处理后p38MAPK磷酸化水平降低(P <0. 05)。结论 P2X7R拮抗剂通过抑制p38MAPK磷酸化在原代神经元OGD模型中发挥抗凋亡作用。

• 单位
  徐州医科大学; 神经内科