成年大鼠侧脑室下区星形胶质细胞的分离培养及纯化研究

作者：朱振中; 贺西京; 杨浩; 历强; 樊沛; 臧全金; 杨平林; 江枫

来源：神经解剖学杂志, 2008, (01): 19-25.

DOI：10.3969/j.issn.1000-7547.2008.01.004

• 细胞培养
• 星形胶质细胞
• 侧脑室下区
• 神经干细胞

成年哺乳动物侧脑室下区星形胶质细胞(AST)的神经干细胞特性研究是当前神经科学领域的热点,为了进一步了解AST生物学特性,体外培养是探讨AST细胞学特性的有力手段,而怎样通过体外培养得到高纯度的成年AST是亟待解决的问题。本研究以2.5月的成年大鼠侧脑室下区为实验材料进行AST培养,并对传统的培养方法进行改良。首先在AST培养基中增加B27添加剂,结合成年AST体外生长特性,采用低浓度血清(2.5%～5%)和血清浓度调整法对培养的AST进行纯化。然后采用GFAP免疫细胞化学染色方法对培养至14d的细胞进行鉴定及纯度检测,采用流式细胞仪检测B27添加剂对AST细胞周期的影响。结果显示:B27添加剂能有效促进体外培养的成年AST的生长和增殖,采用此方法培养的成年AST纯度达90%以上;B27添加剂与低浓度血清的组合以及根据细胞特性及时调整血清浓度是一种有效的纯化成年AST方法。本方法的建立可望为AST的神经干细胞特性研究提供理想的细胞模型。

• 单位
  第四军医大学; 西安交通大学第一附属医院; 西安交通大学第二附属医院