大鼠尾椎髓核干细胞的分离与分化能力

作者：沈阳; 徐宏光^*; 张屿; 王效; 肖良; 刘晨; 金中行

来源：皖南医学院学报, 2018, 37(06): 516-526.

• 髓核组织
• 干细胞
• 多向分化
• Ⅰ型胶原酶消化

目的:分离大鼠尾椎髓核干细胞(NPSCs),并检测其多向分化的能力。方法:取4周龄大鼠10只,解剖显微镜下分离尾椎C1～C5的髓核,经Ⅰ型胶原酶消化获得髓核原代细胞(NPCs),按照200个/cm2的细胞密度接种于10 cm培养皿,获取细胞集落,观察集落细胞的形态特点,并与NPCs比较。并将获得的细胞集落按照50个/cm2的密度进行单克隆形成能力检测。进行成骨、成脂肪及成软骨方向分化诱导,分别用茜素红、油红O及番红染色鉴定。结果:髓核组织呈半透明的胶质状,质软。按照200个/cm2的细胞密度接种培养髓核细胞,在培养3～5 d可见细胞集落形成,且集落内细胞的形态呈梭形,无"空泡"。而NPCs呈不规则性状,且细胞内含有较多"空泡"。获得的细胞集落仍然具有单克隆形成能力。且体外能进行成骨、成脂肪及成软骨方向分化诱导。结论:大鼠髓核组织中存在干细胞,按照200个/cm2的密度能够分离出NPSCs,且具有成骨、成脂肪及成软骨等多向分化的能力。

• 单位
  皖南医学院第一附属医院