PINK1/Parkin介导的线粒体自噬在异烟肼诱导的肝细胞损伤中的作用

作者：许允; 李异^*

来源：中南大学学报(医学版), 2022, 47(09): 1200-1207.

• 异烟肼
• 同源性磷酸酶及张力蛋白诱导激酶1/Parkin信号轴
• 线粒体自噬
• 肝损伤

目的：结核病患者长期大剂量联合使用抗结核药物会引起肝损伤等不良反应，但引起损伤的机制尚不明确。尽管同源性磷酸酶及张力蛋白诱导激酶1(phosphatase and tensin homolog induced kinase 1,PINK1)/Parkin信号轴可能通过调控线粒体自噬和肝细胞内氧化应激水平而参与肝损伤过程，但目前尚不清楚药物致肝损伤与该信号轴调控的线粒体自噬机制间的相关性。本研究旨在探究PINK1/Parkin信号轴是否可通过调控线粒体自噬改善抗结核药物用药过程中出现的肝细胞损伤，从而为临床结核病患者使用抗结核药物治疗过程导致的肝损伤提供潜在的药物治疗靶点。方法：使用异烟肼(isoniazide,INH)处理小鼠肝实质细胞AML-12以模拟肝损伤状态，分别采用real-time PCR和蛋白质印迹法检测正常AML-12细胞(对照组)、INH刺激的肝损伤模型(模型组)及INH和PINK1激动剂红景天甙共同刺激下的AML-12细胞(干预组)中PINK1、Parkin以及自噬相关分子的表达水平。利用ELISA试剂盒检测肝细胞内活性氧(reactive oxygen species,ROS)水平，采用HE染色及透射电镜技术观察细胞的肝细胞形态结构。结果：与对照组比较，模型组中PINK1、Parkin和微管相关蛋白1轻链3(microtubule associated protein 1 light chain 3,LC3)的mRNA表达水平(P<0.01)以及蛋白质水平(P<0.05)均显著下降，同时泛素化蛋白水平显著下调(P<0.05),ROS水平升高(P<0.05)，细胞损伤明显。与模型组相比，干预组中使用红景天甙后PINK1、Parkin和自噬相关分子LC3的mRNA及蛋白质水平均显著升高(均P<0.05)，泛素化蛋白水平亦显著升高(P<0.05)，同时线粒体介导的ROS水平下降(P<0.05)，肝细胞损伤状态明显减轻。结论：本研究利用体外细胞实验证明了PINK1/Parkin信号轴介导的线粒体自噬机制可能与异烟肼所致肝细胞的损伤相关，并能调控损伤状态，提示Parkin是一个潜在的药物致肝损伤预测及诊疗的分子靶点。

• 单位
  中南大学湘雅二医院