Netrin-1慢病毒表达载体的构建及鉴定

作者：陈景祥; 王国华; 任小宝; 屈纪富; 孙溦

来源：现代生物医学进展, 2010, (04): 630-632.

DOI：10.13241/j.cnki.pmb.2010.04.007

• Netrin-1
• 慢病毒载体
• 神经发育 Netrin-1
• lentiviral vector
• development of neuron

目的:构建携带有Netrin-1基因的逆转录病毒载体,为研究Netrin-1在神经发育中的作用奠定基础。方法:PCR扩增Netrin-1基因片段后,将其克隆入慢病毒表达载体pLXSN;通过PCR、酶切、测序鉴定重组质粒。重组质粒转染PA317包装细胞后获得包装的病毒颗粒。病毒颗粒感染人脑胶质瘤细胞SW038-C2,经Western blot证明重组病毒在真核细胞内表达Netrin-1的情况。结果:经PCR扩增、酶切和测序验证,重组质粒构建正确,命名为pLX-NT。Western blot证明在感染细胞泳道有一特异性条带。结论:成功构建了能表达Netrin-1的慢病毒载体。

• 单位
  中国人民解放军陆军军医大学