摘要
目的 探讨hsa_circ_0006370在高糖诱导的肾小管上皮细胞铁死亡中的作用。方法 培养人近曲小管上皮细胞HK-2,RT-qPCR检测高糖和爱拉斯汀(Erastin)处理对HK-2细胞中hsa_circ_0006370表达的影响。在HK-2细胞中干扰hsa_circ_0006370表达,将实验分为4组:高糖+si-NC、高糖+si-hsa_circ_0006370、Erastin+si-NC和Erastin+sihsa_circ_0006370,RT-qPCR检测各组细胞中hsa_circ_0006370的表达水平;MTS实验检测各组细胞的增殖水平;相对应试剂盒分别检测各组细胞内铁离子、活性氧(ROS)、乳酸脱氢酶(LDH)、丙二醛(MDA)、胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)水平;Western blot检测各组细胞中的GPX4、xCT、FT、TFR、NRF2、HO-1蛋白表达水平。结果 和正常培养组相比,高糖培养组和Erastin培养组细胞中hsa_circ_0006370表达水平显著升高(P均<0.01)。与高糖+si-NC组相比,高糖+si-hsa_circ_0006370组细胞中hsa_circ_0006370相对表达水平显著降低(P<0.01),细胞的增殖能力显著增强(P<0.01),细胞内铁离子、ROS、LDH和MDA活性水平均显著降低,而GSH-Px水平明显增加(P均<0.01),细胞中的GPX4、xCT、FT、NRF2和HO-1蛋白表达水平显著升高,而TFR蛋白表达水平显著降低;与Erastin+si-NC组相比,Erastin+si-hsa_circ_0006370组细胞中hsa_circ_0006370相对表达水平显著降低(P<0.01),细胞的增殖能力显著增强(P<0.01),细胞内铁离子、ROS、LDH和MDA活性水平均显著降低,而GSH-Px水平显著增加(P均<0.01),细胞中的GPX4、xCT、FT、NRF2和HO-1蛋白表达水平显著升高,而TFR蛋白表达水平显著降低。结论 hsa_circ_0006370促进高糖诱导的肾小管上皮细胞HK-2铁死亡。
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单位广州医科大学附属顺德医院; 暨南大学附属广州红十字会医院; 广州医科大学附属第五医院