摘要

随着转基因技术的快速发展,转基因水稻的研发进展迅速,已有多个转基因水稻优良品系进入环境释放阶段。为了防止实验材料的意外扩散,保障生物安全和米制品贸易,急需灵敏、高效的检测方法作为监管的技术支撑。本研究以转基因水稻中最常用的CaMV35S启动子、NOS终止子、Cry1Ab/Ac基因、HPT基因及SPS水稻内标基因为研究对象,利用5种不同的荧光信号(FAM、HEX、Taxas Red、Cy5、Cy5.5)进行多重实时荧光PCR检测方法的研究。通过引物组合筛选、反应体系优化、特异性测试、灵敏度测试、适用性测试等一系列实验,建立了五重荧光PCR方法,灵敏度可达0.032%。此方法具有灵敏度高、结果准确...