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摘要
全球转基因油菜的数量和种类日益增多，其所带来的潜在风险也备受人们的关注，迫切需要开发一套精准、高效、便捷检测转基因油菜的技术体系。本研究针对花椰菜花叶病毒35 S启动子(pCaMV 35S)、膦丝菌素乙酰转移酶(bar)、5-莽草酸-3-磷酸合成酶基因(epsps)3个目标基因的序列，以及油菜内源基因cruciferinA (CruA)序列设计四重实时荧光定量聚合酶链式反应(Multiplex real-time fluorescence quantitative PCR)特异性强的引物和多重荧光探针。通过对多个转基因油菜材料验证，结果表明该方法检测特异性强，重复性好，4个基因的扩增效率都在90%～105%间，标准曲线相关系数R~(2)都大于≥0.99。转基因成分bar，epsps和pCaMV35S的检出限为0.1 ng/μL，内参基因CruA的检出限为0.01 ng/μL。本研究建立了一种能快速、高效、准确检测转基因油菜四重实时荧光定量PCR技术的检测体系。
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