长链非编码RNA小核仁RNA宿主基因16对急性肺栓塞小鼠肺动脉平滑肌细胞增殖和凋亡的影响

作者：敖思悦^*; 陈东; 左骑

来源：中国临床药理学杂志, 2021, 37(12): 1562-1565.

DOI：10.13699/j.cnki.1001-6821.2021.12.023

• 长链非编码RNA小核仁RNA宿主基因16
• 微小RNA-106b-5p
• 核受体亚家族4组A成员3
• 急性肺栓塞

目的研究长链非编码RNA小核仁RNA宿主基因16 (lncRNA SNHG16)通过微小RNA-106b-5p(miR-106b-5p)/核受体亚家族4组A成员3(NR4A3)对急性肺栓塞(APE)小鼠肺动脉平滑肌细胞(PASMCs)增殖和凋亡的影响及机制。方法用颈总静脉注射自体血栓法建立APE小鼠模型,将小鼠随机分为假手术组和模型组,并制备小鼠PASMCs。随后,将空白质粒(设为pcNC组)、SNHG16过表达质粒(设为pc-SNHG16组)、阴性对照寡核苷酸(设为miR-NC组)和miR-106b-5p模拟物(设为miR-106b-5p mi组)分别转染至模型组小鼠PASMCs中。用5-乙炔基-2’脱氧尿嘧啶核苷(Ed U)染色实验检测PASMCs增殖能力;用原位末端脱氧核苷酸转移酶标记(TUNEL)法检测PASMCs凋亡率;用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测PASMCs中miR-106b-5p的表达;用双荧光素酶报告基因实验验证miR-106b-5p与SNHG16之间的结合关系;用Western blot检测PASMCs中NR4A3蛋白的表达。结果假手术组、模型组、pc-NC组和pc-SNHG16组细胞增殖率分别为(29.57±2.86)%,(33.08±0.96)%,(32.85±2.41)%,(36.86±2.25)%;细胞凋亡率分别为(19.25±1.09)%,(17.04±1.33)%,(15.80±1.77)%,(10.93±1.40)%;以上指标,假手术组和模型组相比,pc-NC组和pcSNHG16组相比,差异均有统计学意义(均P<0.05)。过表达SNHG16可显著降低miR-106b-5p的表达,双荧光素酶报告基因实验证实miR-106b-5p与SNHG16可直接结合,过表达miR-106b-5p可显著降低NR4A3蛋白的表达。结论 SNHG16通过调控miR-106b-5p/NR4A3轴促进APE小鼠模型PASMCs增殖,并抑制细胞凋亡。

• 单位
  长沙市第一医院