枯草芽孢杆菌细胞壁通过TLR-2-MyD88-NF-κB/MAPK信号通路调控绵羊瘤胃上皮细胞β-防御素-1的表达

作者：辛雅明; 白绥明; 白刚; 高景鹏; 樊翀宇; 韩彩霞; 周伟; 张文彦; 永荣; 齐盟; 肖红; 杨银凤^*

来源：中国兽医杂志, 2023, 59(10): 1-8.

• 枯草芽孢杆菌细胞壁
• 绵羊瘤胃上皮细胞
• β-防御素-1
• 抑制剂
• 信号通路

为了探索枯草芽孢杆菌细胞壁诱导绵羊β-防御素-1(SBD-1)表达的主要信号转导途径，本试验首先使用反复冻融法与超声波破碎法相结合的方法破碎枯草芽孢杆菌并收集其细胞壁，酶联免疫吸附测定(ELISA)检测方法分析细胞壁成分及其含量，然后利用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)和蛋白质免疫印迹(Western blot, WB)方法检测枯草芽孢杆菌细胞壁刺激绵羊瘤胃上皮细胞(ORECs)后通路因子(TLR-2、MyD88、NF-κB、p38、JNK和ERK1/2)mRNA和蛋白的表达变化，最后使用通路抑制剂分别阻断NF-κB、p38、JNK和ERK1/2信号通路，用枯草芽孢杆菌细胞壁刺激ORECs并检测刺激后SBD-1 mRNA表达变化，从而确定诱导SBD-1表达的主要信号通路。结果显示，枯草芽孢杆菌细胞壁制备成功，细胞壁主要成分为肽聚糖和磷壁酸，含量分别为(90.85±0.91)%和(8.85±0.11)%。与对照组相比，枯草芽孢杆菌细胞壁刺激ORECs后信号通路因子(TLR-2、MyD88、NF-κB、p38、JNK和ERK1/2)的mRNA和蛋白的表达水平均显著升高(P<0.05或P<0.01),使用通路抑制剂阻断各个信号通路后再刺激ORECs,SBD-1 mRNA表达水平均极显著下降(P<0.01),且添加NF-κB和JNK抑制剂组下降幅度最大。结果表明，枯草芽孢杆菌细胞壁可能通过TLR-2-MyD88-NF-κB/MAPK信号通路调控ORECs SBD-1的表达。

• 单位
  内蒙古农业大学