摘要
利用大肠杆菌表达系统制备了重组融合蛋白antiEGFR/MEL,并用Ni2+层析柱对其进行了纯化.该重组蛋白中抗表皮生长因子受体(antiEGFR)单链抗体(scFv)主要靶向喉癌细胞中的EGFR,而蜂毒肽(MEL)主要抑制肿瘤细胞增殖.采用SDS-PAGE和Westernblot检测证明了antiEGFR/MEL的有效表达.共聚焦显微镜和流式细胞术实验结果表明,antiEGFR/MEL可与Hep-2肿瘤细胞有效结合,而几乎不与EGFR阴性的Jurkat细胞结合.噻唑蓝(MTT)检测结果说明,antiEGFR/MEL可有效抑制人喉癌细胞Hep-2的增殖.以上结果表明,antiEGFR/MEL能够有效靶向EGFR阳性肿瘤细胞,并有效抑制肿瘤细胞增殖,有望应用于EGFR靶向肿瘤治疗.
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单位吉林大学; 吉林大学中日联谊医院; 日照市东港区人民医院; 吉林省肿瘤医院