摘要
目的探讨三氧化二砷(As2O3)对结膜囊成纤维细胞中Bcl-2表达及其对成纤维细胞(fibroblast,Fb)凋亡的影响。方法取健康哈白兔,麻醉后无菌条件下取兔眼结膜下Tenon’s囊组织进行Fb的培养,实验组用5、10μmol/L的As2O3分别处理24、48 h,对照组加同体积的生理盐水,免疫荧光显微镜下观察Fb细胞核的凋亡,记录不同浓度及作用时间下的凋亡指数,并采用Western blot蛋白印迹法检测Bcl-2的表达。结果对照组的Fb细胞核呈现浅蓝色,染色质疏松且均匀;实验组的Fb细胞核出现凋亡小体且呈现亮蓝色,细胞核萎缩、凝聚,部分出现断裂。随着As2O3剂量的加大及作用时间的延长,凋亡小体的细胞数增多明显,差异有统计学意义(P<0.05),且凋亡细胞数出现剂量及时间依赖关系(r=10.235,r=8.330,P<0.05)。As2O3处理后的Fb细胞,其Bcl-2的蛋白表达降低明显,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 As2O3可诱导结膜囊成纤维细胞发生凋亡,且其诱导凋亡作用存在一定的剂量和时间依赖性;凋亡与下调Bcl-2的表达,激活Caspase-3有关。
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单位哈尔滨医科大学附属第一医院