摘要
本试验旨在探究苜蓿中黄酮特征指纹图谱及其主效成分发挥抗氧化能力的谱-效关系。本试验在构建苜蓿中黄酮特征指纹图谱的基础上,采用体外抗氧化法测定14种苜蓿来源的黄酮对1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH)、2,2′-联氮-双-3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸(ABTS)自由基的清除力和还原力的影响,并通过半数抑制浓度系数(IC50)和半数最大效应浓度系数(EC50)评价14种苜蓿中黄酮的体外抗氧化活性;运用主成分分析、偏最小二乘回归模型和多变量间相关性分析构建谱-效关系。结果表明:1)成功构建14种苜蓿来源黄酮的指纹图谱,并确定9个共有峰,其相似度范围在0.471~0.976;指认出峰2为芹菜素,峰3为苜蓿素,峰4为山奈酚。2)14种苜蓿中的黄酮清除DPPH的IC50为1.120~2.149 mg/mL,ABTS的IC50为0.302~0.759 mg/mL,达到还原力的EC50为0.035~0.143 mg/mL。3)经主成分分析、偏最小二乘回归模型和多变量之间相关性分析,峰1、峰6的面积与苜蓿中黄酮抗氧化活性呈显著正相关(P<0.05),峰2的面积与还原力的活性呈显著负相关(P<0.05)。综上所述,通过对苜蓿中黄酮的谱-效关系研究,初步确定了14种苜蓿来源黄酮中具有抗氧化活性的成分为峰1、峰3(苜蓿素);峰6、峰8为DPPH自由基清除主效因子,峰1、峰2(芹菜素)、峰4(山奈酚)、峰6、峰7为ABTS自由基清除主效因子,峰1、峰4(山奈酚)、峰7、峰8为还原力的主效因子,本试验结果为苜蓿黄酮作为一种天然抗氧化饲料添加剂的研究应用提供理论依据。
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